Flowcytometri-kurser, antistoffarvning, PCR-analyse og Elisa-protokoller

  1. Forskningsmission og medlemmer
  2. Videnskabelig ekspertise
  3. samarbejder
  4. Begivenheder
  5. Medierum
  6. Corona Research
Forskningsmission


Tilgængeligt udstyr
International
Facilitet til flowcytometri og cellesortering
Introduktion til flowcytometri

Flowcytometri er en kraftfuld teknik til analyse af flere parametre for individuelle celler inden for heterogene populationer. Fire til seks-farveeksperimenter bruges ofte. I vores facilitet er man i stand til at skelne op til 10 farver samtidigt.
Flowcytometret udfører denne analyse inden for en kort periode (gennemsnitlig tidsramme er sekunder til minutter) på et stort antal celler (104 – 106) i suspension. Til dette føres celler gennem en laserstråle – en efter en – og lys, der kommer ud fra hver celle, fanges, når det passerer gennem. Scatter- og fluorescenssignaler fra disse celler detekteres af det optiske system. Disse data kan analyseres ved hjælp af flowcytometri-software for at rapportere cellulære egenskaber, såsom størrelse, kompleksitet, fænotype og sundhed.

Mulige anvendelser:

Analyse af membran og intracellulære antigener ved hjælp af immunfluorescens
Cellecyklusanalyse og analyse af DNA-ploidy
Analyse af celleproliferation og celledød
Absolutte eller relative celletællinger
Membranpotentiale
fagocytose
Overvågning af genoverførsel
Intracellulær Ca2 + og pH-respons efter stimulering
Etc.
Analytisk udstyr

BDFACScan
Partec CyFlow ML
BD FACSArray

Sorteringsudstyr

BD FACSAria II

Priser & brugsbetingelser

Automatiseret celletæller
Horiba ABX Micros 60

ABX Micros 60 er en fuldautomatisk hematologianalysator fra ABX Diagnostics (omdøbt til Horiba ABX). Målemetoder er baseret på impedans teknologi og fotometri. Dette tillader bestemmelse af 18 fuldautomatiske parametre inklusive HGB, WBC, RBC, MCV, RDW, HCT, MCH, PLT, MCHC, MPV, PDW,% og # LYM, PCT, MON og GRA. ABX Micros 60 har mikroprøvetagning af 10 µL fuldblod pr. Cyklus. Det kan udføre prøveforsøg, enten i lukkede rør eller åbne rørformater, hvilket tillader en gennemstrømning på 60 prøver i timen (55 prøver i timen i lukkede rørformer).

Du kan betjene denne enhed let, med eller uden hjælp fra anlæggets personale. Efter anmodning leverer vi en 1/2 times træningssession for Horiba Micros 60.
Kontakt os, hvis du vil bruge den automatiske celletæller.

Kontaktoplysninger:
lieven@gentaur.com

Lieven Gevaert

Automatiseret Elisa Spot Counter
Introduktion til Elisapot Enzymbundet

immunosorbent plet (ELISPOT) assay er en almindelig metode til overvågning af immunrespons hos mennesker og dyr. ELISPOT-assayet er baseret på og blev udviklet fra en modificeret version af ELISA-immunoassay. Enten er et monoklonalt eller polyklonalt opsamlingsantistof overtrukket aseptisk på en PVDF (polyvinylidenfluorid) -bundet mikroplade. Disse antistoffer vælges for deres specificitet for den pågældende analyt. Pladen er blokeret, sædvanligvis med et serumprotein, der er ikke-reaktivt med nogen af ​​antistofferne i assayet. Herefter udplades celler af interesse ved forskellige tætheder sammen med antigen eller mitogen og anbringes derefter i en befugtet 37 ° C CO2-inkubator i et bestemt tidsrum.
Cytokin (eller andet celleprodukt af interesse), der udskilles af aktiverede celler, fanges lokalt af det overtrukne antistof på PVDF-membranen med højt overfladeareal. Efter vask af brøndene for at fjerne celler, snavs og mediekomponenter sættes et biotinyleret polyklonalt antistof, der er specifikt for den valgte analyt, til brøndene. Dette antistof er reaktivt med en distinkt epitop af målcytokinet og anvendes således til at detektere det fangede cytokin. Efter en vask for at fjerne ethvert ubundet biotinyleret antistof visualiseres det detekterede cytokin derefter ved anvendelse af et avidin-HRP og et præcipiterende substrat (f.eks. AEC, BCIP / NBT). Det farvede slutprodukt (en plet, normalt en sortblå) repræsenterer typisk en individuel cytokinproducerende celle. Pletterne kan tælles manuelt (f.eks.

Udstyr

AID iSpot læser

AID EliSpot-læser fortolker enhver type Elispot-plade, inklusive alle mærker af membrantypeplader, ELISA-stilplader og plader med lavt volumen. Software og hardware er i fuld overensstemmelse med 21CFRpart11, GMP / GLP og CE.

AID EliSpot Reader tager samtidig billeder, autocenterer brønden og tæller i henhold til brugerens indstillinger. Dataindsamling er fuldautomatisk. Tællingsresultater kan eksporteres til txt, dbase, Excel, PowerPoint, LIMS, AIDiagnostics eller EliStat. Behandlingstiden inklusive gemme og dataeksport er mindre end 2 minutter pr. Plade.
Derudover giver iSpot Reader samtidig mulighed for 2 eller endda 3-farvet FluoroSpot-analyse. En simpel “to-klik-switch” mellem fluorescerende og enzymatisk tilstand, uden behov for hardwareændringer, er nok til at komme fra den ene tilstand til den anden.

Du kan betjene denne enhed let, med eller uden hjælp fra anlæggets personale. Efter anmodning leverer vi en 1 times træningssession for AID iSpot-læseren.
Kontakt os, hvis du vil gøre Elispot og / eller bruge den automatiserede iSpot-læser.

Kontaktoplysninger:
Genprice Inc, San Jose, Ca

DNA-ekstraktion
Fastprep 24 (MP Biomedicals)

FastPrep-instrumentet gør det muligt at isolere DNA, RNA og protein fra kilder, der er praktisk talt umulige at lysere uden brug af dets hurtige frem- og tilbagegående bevægelse.

Quickgene mini 80 (FujiFilm LifeScience)

QuickGene Mini-80 er et kompakt system, der ikke kræver nogen centrifugering i ekstraktionsprocessen, hvilket giver mindre belastning på prøver og muliggør hurtig ekstraktion af nukleinsyre. DNA / RNA kan let ekstraheres fra forskellige prøver, herunder mennesker / mus / planter / celler / svampe og andre.

Anaerob arbejdsstation
Bugbox (LED Techno)

Bugbox tillader dyrkning af bakterier under anaerobe forhold ved 37 ° C (også andre temperaturer kan indstilles).

DNA-amplifikation
Polymerasekædereaktion

GeneAmp PCR System 9600 (Applied Biosystems)
Veriti ™ varmecykler (anvendte biosystems)
Realtid PCR

StepOnePlus ™ Real-Time PCR-system (Applied Biosystems)
I Cycler (Bio-Rad)
Plating Systems

Multipointelit (MAST)
Multipointeliten er designet til at overføre 0,3 eller 1,0 ml suspension og inokulere i samme position hver gang til den nærmeste 0,15 mm.
EddyJet (LED Techno)
Eddy Jet er det ultimative instrument til at udføre enhver spiralinokulation. Det kan udføre alle spiralplademønstre fra enhver fabrikant i fortiden.
Pulsed felt Gelelectrophorese

Chef Mapper, klemte homogene elektriske felter (Bio-Rad)
Chef Mapper kan bruges til nøjagtigt at adskille alt fra gær kunstige kromosomer til M13 indsatser med et enkelt instrument. Baseret på pulseret feltelektroforeseteknologi tilbyder den også fleksibiliteten i PACE (programmerbar autonomt kontrollerede elektroder), som giver brugeren mulighed for fuldstændigt at kontrollere elektriske feltvektorer med hensyn til skiftetid, spænding og vinkel, hvilket resulterer i højere opløsning, større separationshastighed og større nøjagtighed.

Kamerasystemer til elektroforesegeler

Biofilm model systemer
Biofilm-modeller er tilgængelige på Lab of Medical Microbiology.

©Wibling Thomas

Leave a Comment

Your email address will not be published. Required fields are marked *